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Ce document de travail est mis à disposition par l’auteur et nécessite une appropriation par l’utilisateur. Libre de droit d'utilisation et de reproduction à des fins pédagogiques non lucratives. Extraction et observation de l’ADN de la levure Saccharomyces cerevisiae Domaine santé - recherche Durée : 80 min
Document enseignant Extraction et observation de l’ADN de la levure  Saccharomyces cerevisiaeI-Découverte de l’ADN L’ADN est une sorte de « carte d’identité ». Cet élément, contenu dans toutes les cellules de notre corps (plus précisément dans les chromosomes) nous est transmis par nos parents. Il définit de quelle couleur seront nos yeux par exemple, mais aussi des centaines d’autres caractéristiques qui font de nous un être unique. L’ADN fut découvert par James Watson (américain) et Francis Crick (anglais). -Année de découverte de l’ADN : --1953----------------------- -Définir L’ADN :--- L'ADN est une molécule qui contient toutes les informations génétiques d'un individu.---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- II-Structure de l’ADN La molécule d'ADN est une double hélice dont chacun des deux brins est orienté de façon opposée (⇋). Elle est composée de l'assemblage dans un ordre précis de chacune des quatre bases azotées : A (adénine), T (thymine), G (guanine) et C (cytosine). C Structure de l’ADN Dessin de deux brins d’ADN opposés et linéaires contenant les bases azotées A, T ,C et G. haque brin est l'exact complémentaire de l'autre. Chaque A s'associe toujours à un T, et un G à un C. III-Extraction de l’ADN de Saccharomyces cerevisiae III-Extraction de l’ADN de saccharomyces cerevisiae a-objectif Extraire et observer le matériel génétique d’une cellule eucaryote b -Matériel à votre disposition -Une suspension de Saccharomyces cerevisiae préparée à partir d’un cube de levures -Papier filtre -Entonnoir -Sel de table : NaCl -Liquide vaisselle -Alcool froid -Tube à essai-Becher c-Principe La manipulation consiste à récupérer l’ADN contenu dans le noyau au cœur des cellules. Quelles sont les barrières qui empêchent l’ADN de sortir de la celllule ? Si on souhaite récupérer l’ADN que doit –on faire ? Le noyau contient aussi des protéines. Que doit-on faire pour purifier l’ADN ? L’ADN purifié est-il visible à l’œil nu ? Comment le visualiser ? d- Mode opératoire Compléter le tableau suivant : A faire trouver par les élèves en dessinant une cellule eucaryote au tableau et en mettant le matériel devant eux
Réaliser un schéma de manipulation dans le cahier de laboratoire Réaliser la manipulation 1) Vider la suspension dans un bécher 2) Ajouter deux cuillères de liquide vaisselle et bien mélanger 3) Ajouter deux cuillères de sel et bien mélanger 4) Mettre un papier filtre dans un entonnoir et 5) Filtrer la solution 6) et récupérer le filtrat dans un tube à essai 7) Rajouter autant d’alcool que le filtrat dans le tube à essai 8) Observer l’apparition des filaments d’ADN (possibilité de colorer avec du vert de méthyle) IV-Les maladies génétiques et la thérapie génique. Une maladie génétique est une maladie résultant de l’altération d’un ou plusieurs gènes malades. Qu'est-ce-qu'un gène? -------Un segment d’ADN qui produit une molécule précise------------------------------------------------------------------------------------------ On dénombre environ 8000 maladies génétiques. La mucoviscidose par exemple empêche de respirer normalement. Proposer un autre exemple de maladie génétique : ---------------------------------- Certains enfants sont touchés par la maladie. Ils ne vivent pas comme tous les autres enfants, certaines choses sont plus compliqués pour eux, mais ils ont les mêmes besoins et envies : aller à l’école, s’amuser, avoir des amis ! De nombreuses recherches sont faites sur les maladies génétiques. Un traitement consiste à remplacer un gène malade par un gène normal. On appelle cette technique la « ---Thérapie génique--------------------------- ». Mais il y a encore beaucoup de recherches à faire pour arriver à soigner tous les malades atteint de maladie génétique... Le Téléthon est une émission de télévision qui explique ce que sont les maladies génétiques et qui permet de récolter de l'argent pour aider les chercheurs à trouver des remèdes.  Document élève Extraction et observation de l’ADN de la levure Saccharomyces cerevisiaeI L’ADN est une sorte de « carte d’identité ». Cet élément, contenu dans toutes les cellules de notre corps (plus précisément dans les chromosomes) nous est transmis par nos parents. Il définit de quelle couleur seront nos yeux par exemple, mais aussi des centaines d’autres caractéristiques qui font de nous un être unique. L’ADN fut découvert par James Watson (américain) et Francis Crick (anglais). Année de découverte de l’ADN : --------------------------- Définir L’ADN :------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -Découverte de l’ADN II-Structure de l’ADN La molécule d'ADN est une double hélice dont chacun des deux brins est orienté de façon opposée (⇋). Elle est composée de l'assemblage dans un ordre précis de chacune des quatre bases azotées : A (adénine), T (thymine), G (guanine) et C (cytosine). C Structure de l’ADN Dessin de deux brins d’ADN opposés et linéaires contenant les bases azotées A, T ,C et G. haque brin est l'exact complémentaire de l'autre. Chaque A s'associe toujours à un T, et un G à un C. III-Extraction de l’ADN de Saccharomyces cerevisiae III-Extraction de l’ADN de Saccharomyces cerevisiae a-objectif Extraire et observer le matériel génétique d’une cellule eucaryote b -Matériel à votre disposition -Une suspension de Saccharomyces cerevisiae préparée à partir d’un cube de levures -Papier filtre -Entonnoir -Sel de table : NaCl -Liquide vaisselle -Alcool froid -Tube à essai-Becher c-Principe La manipulation consiste à récupérer l’ADN contenu dans le noyau au cœur des cellules. Quelles sont les barrières qui empêchent l’ADN de sortir de la celllule ? Si on souhaite récupérer l’ADN que doit –on faire ? Le noyau contient aussi des protéines. Que doit-on faire pour purifier l’ADN ? L’ADN purifié est-il visible à l’œil nu ? Comment le visualiser ? d- Mode opératoire
Réaliser un schéma de manipulation dans le cahier de laboratoire e)Réaliser la manipulation 1) Vider la suspension dans un bécher 2) Ajouter deux cuillères de liquide vaisselle et bien mélanger 3) Ajouter deux cuillères de sel et bien mélanger 4) Mettre un papier filtre dans un entonnoir et 5) Filtrer la solution 6) et récupérer le filtrat dans un tube à essai 7) Rajouter autant d’alcool que le filtrat dans le tube à essai 8) Observer l’apparition des filaments d’ADN (possibilité de colorer avec du vert de méthyle) IV-Les maladies génétiques et la thérapie génique. Une maladie génétique est une maladie résultant de l’altération d’un ou plusieurs gènes malades. Qu'est-ce-qu'un gène? ------------------------------------------------------------------------------------------------- On dénombre environ 8000 maladies génétiques. La mucoviscidose par exemple empêche de respirer normalement. Proposer un autre exemple de maladie génétique : ---------------------------------- Certains enfants sont touchés par la maladie. Ils ne vivent pas comme tous les autres enfants, certaines choses sont plus compliqués pour eux, mais ils ont les mêmes besoins et envies : aller à l’école, s’amuser, avoir des amis ! De nombreuses recherches sont faites sur les maladies génétiques. Un traitement consiste à remplacer un gène malade par un gène normal. On appelle cette technique la « ------------------------------ ». Mais il y a encore beaucoup de recherches à faire pour arriver à soigner tous les malades atteint de maladie génétique... Le Téléthon est une émission de télévision qui explique ce que sont les maladies génétiques et qui permet de récolter de l'argent pour aider les chercheurs à trouver des remèdes. Commande extraction ADN de S. cerevisiae pour 19 élèves par groupe (2 groupes : mardi et jeudi) Matériels par binôme -Une suspension de Saccharomyces cerevisiae préparée à partir d’un cube de levures (pour 200 ml : mélanger une banane écrasée avec un cube de levures) et distribuer à raison de 15 mL par tube à essai -Papier filtre -Entonnoir -Sel de table : NaCl -Liquide vaisselle -Alcool froid (minimum 3 pissettes) -Tube à essai vides -Becher -tige pour agitation en verre - 5 cuillères |
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